波多野结衣作品,国产午夜精品一区二区三区嫩草,欧美性狂猛xxxxxbbbbb,中国熟妇色xxxxx中国学生

首頁 > 技術文章 > ELISA試劑盒實驗結果分析報告單

ELISA試劑盒實驗結果分析報告單

2016-11-16 [2702]

ELISA試劑盒的結果判定分為定性和定量兩種 ,在間接法和夾心法ELSIA中,陽性孔呈色深于陰性孔。在競爭法ELISA中則相反,陰性孔呈色深于陽性孔。那么兩類結果如何判斷呢?專業(yè)人士為您解析:
一.間接法和夾心法
這類反應的定性結果可以用肉眼判斷。目視標本也無色或近于無色者判為陰性,顯色清晰者為陽性。但在ELSIA中,正常人血清反應后??沙霈F(xiàn)呈色的本底,此本底的深淺因試劑的組成和實驗的條件不同而異,因此實驗中必須加測陰性對照。陰性對照的組成應為不含受檢物的正常血清或類似物。在用肉眼判斷結果時,更宜用顯色深于陰性對照作為標本陽性的指標。
目視法簡捷明了,但頗具主觀性。在條件許可下,應該用比色計測定吸光值,這樣可以得到客觀的數(shù)據(jù)。先讀出標本(sample,S)、陽性對照(P)、和陰性對照(N)的吸光值,然后進行計算。計算方法有多種,大致可分為陽性判定值法和標本與陰性對照比值法兩類。
1.陽性判定值 
陽性判定值(cut-off value)一般為陰性對照A值加上一個特定的常數(shù),以此作為判斷結果陽性或陰性的標準。
用此法判斷結果要求實驗條件十分恒定,試劑的制備必須標準化,陽性和陰性的對照品應符合一定的規(guī)格,須配用精密的儀器,并嚴格按規(guī)定操作。陽性判定值公式中的常數(shù)是在這特定的系統(tǒng)中通過對大量標本的實驗檢測而得到的?,F(xiàn)舉某種檢測HBsAg的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照品為不含HBsAg的復鈣人血漿,陽性對照品HBsAg的含量標明為P=9±2ng/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均數(shù)(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(P-N)必須大于一個特定的數(shù)值(例0.400),試驗才有效。3個陰性對照A值均應≥0.5×NCX,并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而已另兩個陰性對照重新計算NCX;如有兩個陰性對照A值超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陽性判定值=NCX+0.05,標本A值>陽性判定值的為陽性,小于陽性判定值的為陰性。應注意的是,式中0.05為該試劑盒的常數(shù),只適合于該特定條件下,而不是對各種試劑均可通用。
根據(jù)以上敘述可以看出,在這種方法中陰性對照和陽性對照也起到試驗的質控作用,試劑變質和操作不當均會產生"試驗無效"的后果。
標本/陰性對照比值 
ELISA試劑盒在實驗條件(包括試劑)較難保證恒定的情況下,ELISA試劑盒這種判斷法較為合適。在得出標本(S)和陰性對照(N)的A值后,計算S/N值。也有寫作P/N的,ELISA試劑盒這里的P不代表陽性(positive),而是病人(patient)的縮寫,不應誤解。為避免混淆,更宜用S/N表示。在早期的間接法ELISA中,有些作者定出S/N為陽性標準,現(xiàn)多為各種測定所沿用。實際上每一測定系統(tǒng)應該用實驗求出各自的S/N的閾值。更應注意的是,N所代表的陰性對照是不含受檢物質的人血清。有的試劑盒中所設陰性對照為不含蛋白質或蛋白質含量較底的緩沖液,以致反應后產生的本底可能較正常人血清的本底低得多。因此,這類試劑盒規(guī),如N<0.05(或其他數(shù)值),則按0.05計算,否則將出現(xiàn)假陽性結果。
二.競爭法
在競爭法ELISA中,陰性孔呈色深于陽性孔。陰性呈色的強度取決于反應中酶結合物的濃度和加入競爭抑制物的量,一般調節(jié)陰性對照的吸光度在1.0-1.5之間,此時反應zui為敏感。
競爭法ELISA不易用自視判斷結果,因肉眼很難辨別弱陽性反應與陰性對照的顯色差異,一般均用比色計測定,讀出S、P和N的吸光值。計算方法主要也有兩種,即陽性判定值法和抑制率法。
1.陽性判定值法
與間接法和夾心法中的陽性判定值法基本相同,但在計算公式中引入陽性對照A值,現(xiàn)舉某種檢測抗HBc的試劑盒為例。試劑盒中的陰性對照為不含抗HBc的復鈣人血漿,陽性對照中抗HBc含量為125±100u/ml。每次試驗設2個陽性對照和3個陰性對照。測得A值后,先計算陰性對照A值的平均值(NCX)和陽性對照A值的平均數(shù)(PCX),兩個平均數(shù)的差(N-P)必須大于一個特定的數(shù)值(例如0.300),試驗才有效。3個陰性對照A值均應小于2.000,而且應≥0.5×NCX并≤1.5×NCX,如其中之一超出此范圍,則棄去,而以另2個陰性對照重新計算×NCX;如有2個陰性對照A超出以上范圍,則該次實驗無效。陽性判定值按下式計算:陰性判定值=0.4×NCX+0.6×PCX,標本A值≤陽性判定值的反應為陽性,A>陽性判定值的反應為陰性。 
2.抑制率法 
ELISA試劑盒抑制率表示標本在競爭結合中標本對陰性反應顯色的抑制程度,按下式計算:
抑制率(%)= (陰性對照A值-標本A值)×100%/陰性對照A值,一般規(guī)定抑制率≥50%為陽性,<50%為陰性。

男人tv天堂精品一区二区| 无码人妻| 色欧美片视频在线观看| 国产精品99精品无码视亚| 免费真人视频网站直播下载| 公翁的粗大放进我的秘密电影| 国模私拍| 两女女百合互慰av赤裸无遮挡 | 超大乳抖乳露双乳喷奶水视频 | 狠狠躁夜夜躁人爽碰88a| 免费视频在线观看| 无码欧美人xxxxx日本漫画| 人妻丰满精品一区二区a片| 放荡亲女养成h| 久久亚洲精品中文字幕| 无码精品人妻一区二区三区人妻斩| 部长的夫人的味道中字| 精品亚洲av成人无码明星换脸| 岳把我用嘴含进满足我视频| 餐桌下狂C亲女高辣| 最近日本字幕mv高清在线| 男与女 电影| ysl千人千色t9t9t9| 女人私密深处精油按摩| 老师露出两个奶球让我吃奶头| 人与嘼交av免费| 波多野结衣在线| 黑人巨大vs日本人优在线| 初爱视频教程| 亚洲国产精品尤物yw在线观看| 无码人妻丰满熟妇区五十路| 糙汉lvl奶瘾古言| 男人狂躁进女人免费视频vr| 好先生在线观看免费完整版| 荫蒂添的好舒服视频囗交| 亚洲一区二区观看播放| 日本免费一区二区三区视频观看| 日本人真人姓交大视频| 医生h调教纯情丫头扩y器| 公交车上拨开少妇内裤进入| 亚洲精品一区国产|