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小鼠ΑL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒的應(yīng)用

2022-11-15 [1508]

小鼠ΑL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒背景

小鼠ΑL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒用于體外定量檢測(cè)血清、血漿、組織勻漿及相關(guān)液體樣本中小鼠ΑL巖藻糖苷酶(AFU)的含量。


實(shí)驗(yàn)原理:試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)水平。用純化的小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入αL巖藻糖苷酶(AFU),再與HRP標(biāo)記的αL巖藻糖苷酶(AFU)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的。顏色的深淺和樣品中的αL巖藻糖苷酶(AFU)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中小鼠αL巖藻糖苷酶(AFU)濃度。


小鼠ΑL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒應(yīng)用

用于皂莢提取物對(duì)小鼠肝癌細(xì)胞TGF-β1信號(hào)傳導(dǎo)通路的影響研究探討皂莢提取物對(duì)小鼠肝癌細(xì)胞TGF-β1信號(hào)通路系統(tǒng)調(diào)節(jié)的影響,為臨床中藥抗腫瘤治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。


小鼠ΑL巖藻糖苷酶(AFU)ELISA試劑盒方法本研究取清潔級(jí)昆明種小鼠60只,除空白對(duì)照組小鼠10只外,其余50只小鼠均予肝癌細(xì)胞株H22移植,建立小鼠右上肢皮下移植腫瘤模型,成瘤后50只小鼠被隨機(jī)分為5組進(jìn)行灌胃處理,分別為:皂莢提取物組(高劑量組:18.02g/次;中劑量組:9.01g/次;低劑量組:4.505g/次)、金龍膠囊組(陽性對(duì)照組:9.01g)、生理鹽水組(模型組:9.01ml)上述5組均按劑量給藥,每日三次、另空白對(duì)照組10只(正常喂養(yǎng),不做任何處理)。用專用小鼠灌胃針持續(xù)灌胃給藥15天以后,于第16天處死所有小白鼠,并采取樣本(肝臟組織,眼球取血等),進(jìn)行肝癌細(xì)胞生化學(xué)(肝功能,a-L-巖藻糖苷酶(AFU))及分子生物學(xué)(TGF-β1表達(dá))等指標(biāo)檢測(cè)。


結(jié)果:根據(jù)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)果進(jìn)行分析:給藥后,皂莢提取物高、中、低各組小鼠與金龍膠囊組小鼠TGF-β1表達(dá)陽性率明顯高于模型組和空白對(duì)照組;皂莢提取物組小鼠AFU和肝功能檢測(cè)指標(biāo)降低,與模型組小鼠進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析比較,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。


結(jié)論:皂莢提取物能降低肝癌小鼠AFU的水平;減輕對(duì)肝癌細(xì)胞對(duì)小鼠肝臟的損害;增強(qiáng)TGF-β1的表達(dá),達(dá)到抑制小鼠肝癌細(xì)胞的增殖,并促進(jìn)肝癌細(xì)胞的凋亡。


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